Ю. О. Теселкин, И. В. Бабенкова, Г. И. Клебанов, А. В. Асейчев, Н. А. Тюкавкина, Ю. А. Колесник, И. А. Руленко, В. К. Колхир антиоксидантное действие дигидрокверцетина при общем  облучении1




Скачать 93.74 Kb.
НазваниеЮ. О. Теселкин, И. В. Бабенкова, Г. И. Клебанов, А. В. Асейчев, Н. А. Тюкавкина, Ю. А. Колесник, И. А. Руленко, В. К. Колхир антиоксидантное действие дигидрокверцетина при общем  облучении1
Дата публикации17.09.2014
Размер93.74 Kb.
ТипДокументы
literature-edu.ru > Биология > Документы
УДК 615.322.015.42.076.9

Ю. О. Теселкин, И. В. Бабенкова, Г. И. Клебанов, А. В. Асейчев, Н. А. Тюкавкина, Ю. А. Колесник, И. А. Руленко, В. К. Колхир

АНТИОКСИДАНТНОЕ ДЕЙСТВИЕ ДИГИДРОКВЕРЦЕТИНА ПРИ ОБЩЕМ  - ОБЛУЧЕНИИ1

Кафедра биофизики (зав. — акад. РАМН проф. Ю. А. Владимиров) Российского государственного медицинского университета, ММА им. И. М. Сеченова, ВНИИ лекарственных и ароматических растений

Исследовано влияние природного антиоксиданта дигидрокверцетина (ДГК) на процесс свободнорадикально-го окисления липидов в плазме крови и печени мышей при общем внешнем однократном -облучении в дозе 3,5 Гр. Обнаружено, что содержание продуктов липидной пероксидации, реагирующих с 2-тиобарбитуро-вой кислотой, у облученных животных, получавших ДГК перорально в течение /55 сут после радиационного воздействия (опыт), было достоверно ниже по сравнению с аналогичным показателем у облученных жи­вотных, не получавших антиоксиданта (контроль). Интенсивность Fe2+-индуцированной хемилюминесцен-ции гомогенатов печени мышей опытной группы к концу эксперимента была на 25—30% меньше интенсив­ности свечения гомогенатов печени как контрольных, так и интактных мышей (р < 0,001). Предполагает­ся, что это обусловлено преимущественным накоплением ДГК и продуктов его метаболизма в печени.

Yu. О. Teselkin, I. V. Babenkova, G. I. Klebanov, A. V. Aseichev, N. A. Tyukavkina, Yu. A. Kolesnik, I. A. Rulenko, V. K. Kolkhir. — THE ANTIOXIDATIVE EFFECT OF DIHYDROQUERCETIN DURING TOTAL y-RADIATION

The effects of the natural antioxidant dihydroquercetin (DHQ) on free radical lipid peroxidalion were investigated in the plasma and liver of the mice exposed to single total external radiation at 3.5 Gy. The levels of lipid peroxidation products reacting with 2-thiobarbititric acid in the irradiated animals receiving oral DHQ for /55 days after radia­tion exposure (an experiment group) were found to be significantly lower than those in the irradiated animals un­treated with the antioxidant (a control group). The intensity of Fe2+-induced chemiltiminescence of the liver homage-nates of the experimental animals was 25-30% less than that of control and intact animals (P < 0.001). This can be possibly explained by the predominant hepatic accumulation of DHQ and its metabolic products.

Одной из актуальных задач медико-биологиче­ских исследований является создание новых лекар­ственных препаратов с выраженными антиоксидантными свойствами для лечения заболеваний, сопровождающихся усилением реакций свободно-радикального окисления (СРО) и развитием синдрома липидной пероксидации. В настоящее время в качестве эффективных ан­тиоксидантов хорошо себя зарекомендовали соеди­нения флавоноидной природы растительного про­исхождения [14]. К ним относится дигидрокверце­тин (ДГК) [6], богатым сырьем для промышленного получения которого служит дре­весина лиственницы. Показано, что ДГК проявлял антиоксидантные свойства в различных модельных системах окисления, в частности, тормозил фото­окисление люминола [9], окисление этилбензола, инициированное азобисизобутиронитрилом [4], а также СРО липосом из яичных фосфолипидов, ин­дуцированное с помощью системы Fе2+-аскорбат [10] или фотосенсибилизированное производными гематопорфирина при облучении гелий-неоновым лазером [13]. При этом антиоксидантный эффект ДГК был сравним либо превышал антиоксидант­ный эффект таких известных природных антиок­сидантов, как -токоферол, ликопин, -каротин, карнозин.

Малотоксичность, высокая стабильность при хранении и выраженная антиоксидантная актив­ность позволили использовать ДГК в качестве антиоксидантной пищевой добавки для продления сроков хранения сахаристых кондитерских изделий на жировой основе [8] и сухого молока [5]. Кроме того, на основе шоколада и сухого молока созданы пищевые продукты с добавкой ДГК, выполняющие лечебно-профилактическую функцию по преду­преждению и коррекции состояний, связанных с недостаточным уровнем антиоксидантов в орга­низме [11]. Однако, несмотря на многочисленные исследования, в которых доказано антиоксидант-ное действие ДГК на реакции СРО, протекающие in vitro, влияние ДГК на интенсивность свободно-радикальных процессов, протекающих in vivo, изу­чено недостаточно. Хорошей экспериментальной моделью патологического состояния, сопровож­дающегося развитием синдрома липидной пероксидации, является общее -облучение [7].

Цель настоящей работы — изучение влияния ДГК на СРО липидов, развивающееся при воздей­ствии ионизирующей радиации.

Материалы и методы


Опыты выполнены на 155 мышах-самках линии BALB, содержавшихся на стандартном рационе ви­вария. Возраст животных в начале эксперимента 2—3 мес, масса 17,4 ± 0,8 г. Животные были раз­делены на 3 группы: 1-я — интактные (п = 45), 2-я — контрольные (облученные, п = 50), 3-я — подопытные (облученные и получавшие ДГК, п = 60). Однократное внешнее общее -облучение мышей проводили на установке ГУТ-60 (60Со). По­глощенную дозу 3,5 Гр формировали при постоян­ной мощности дозы 0,6 Гр/мин. ДГК подопытным животным вводили ежедневно перорально через зонд в виде водно-кристаллической суспензии из расчета 100 мг/кг в течение первых 40 сут после об­лучения и 5 мг/кг в последующие сутки до конца эксперимента. Перед облучением и на 15, 40, 70 и 155-е сутки после облучения по 6—30 животных из каждой группы декапитировали под легким эфир­ным наркозом, предварительно извлекая кровь из сердца с помощью шприца с гепарином (20 ЕД на 1 мл крови). Кровь центрифугировали при 900 § в течение 15 мин для получения плазмы. Выделен­ную печень мышей промывали физиологическим раствором, подсушивали с помощью фильтроваль­ной бумаги и использовали для приготовления 5% гомогената в фосфатном буфере (40 мМ КН2РО4, 100 мМ КС1, рН 7,45). Все операции проводили при 4°С.



Рис. 1. Содержание ТБК-РП в плазме крови (а) и печени (б) мышей: светлые кружки — интактных, темные — облученных, треугольники — облученных, получавших ДГК. Здесь и на рис. 3 цифры у кривых в скобках — количество животных в группах к последним суткам эксперимента.

По оси абсцисс — срок наблюдения, сут; по оси ординат — содержание ТБК-РП, нмоль на 1 мг липидов.
Об уровне процесса СРО липидов в плазме кро­ви и печени судили по содержанию в них продук­тов, реагирующих с 2-тиобарбитуровой кислотой (ТБК-РП), которые измеряли флюориметрически [2] с добавлением в инкубационную среду 0,1 мл

10-2 М этанольного раствора ионола. Накопление ТБК-РП в плазме крови и печени выражали в на-номолях на 1 мг липидов. Содержание общих ли­пидов определяли с помощью набора Био-Lache-mа-Тест (Чехия). Принцип метода основан на том, что липиды после их гидролиза концентрирован­ной серной кислотой взаимодействуют с фосфова-нилиновым реактивом с образованием окрашенно­го продукта, который фотометрируют при 530 нм. Для измерения хемилюминесценции (ХЛ) пече­ни в кювету хемилюминометра ХЛМ-3 ("Бикап", Москва) вносили 3,5 мл фосфатного буфера, 1 мл гомогената печени и регистрировали спонтанное свечение в течение 2 мин. Затем в кювету вводили 0,5 мл 25 мМ раствора FеSО4 и измеряли кинетику Fе2+-индуцированной ХЛ в течение 15 мин. Ин­тенсивность ХЛ определяли как разность между максимальным и спонтанным уровнем свечения и выражали в относительных единицах на 1 мг липи­дов.

Результаты обработаны методом вариационной статистики с использованием критерия Стюдента.

Результаты и их обсуждение


Общее радиационное воздействие на мышей в дозе 3,5 Гр вызывало активацию в их организме процесса СРО липидов. Это проявлялось в повы­шении содержания ТБК-РП липидной пероксидации в плазме крови и печени облученных живот­ных по мере увеличения сроков наблюдения (рис. 1,а,б).



Рис. 2, Кинетика Fe2+-индуцированной ХЛ гомогената печени (о); зависимость интенсивности ХЛ (светлые кружки) и накоп­ления ТБК-РП (темные) в реакционной среде от объема до­бавляемого гомогената печени (о).

По оси абсцисс: а — время, мин, б — объем гомогената, мл; по оси ординат: п — интенсивность ХЛ, отн. сд., 6 — слева — интенсивность ХЛ, отн. ед., справа — на­копление ТБК-РП, мкМ.

Так, в частности, к 155-м суткам уровень ТБК-РП в плазме крови и печени животных 2-й группы был соответственно в 2,1 и 1,5 раза вы­ше, чем у животных 1-й группы.

Известно, что общее -облучение сопровожда­ется не только активацией свободнорадикальных реакций, но и усилением расходования эндогенных антиоксидантов, а также снижением активности антиоксидантных ферментов [7]. В связи с этим следовало ожидать, что введение животным экзо­генного антиоксиданта ДГК приведет к торможе­нию СРО липидов в организме облученных мышей. Действительно, у мышей 3-й группы, полу­чавших ДГК, содержание ТБК-РП в плазме крови в течение 70 сут с момента облучения достоверно не отличалось от такового у интактных мышей и лишь затем наблюдалось его увеличение (см. рис. 1, а). Однако и в этом случае уровень ТБК-РП в плаз­ме крови был более низким, чем у животных 2-й группы (р < 0,001). В отличие от плазмы крови со­держание ТБК-РП липидной пероксидации в пе­чени мышей 3-й группы не отличалось от нормы в течение всего эксперимента. Последнее, по-види­мому, обусловлено тем, что печень является орга­ном, играющим важную роль в метаболизме флавоноидов, поступающих в организм с пищей или в виде лекарственных форм. Не случайно некоторые флавоноиды используются в качестве гепатопро-текториых средств при лечении ряда заболеваний и токсических повреждений печени [3, 12]. Гепато-протекторный эффект был обнаружен и у ДГК на моделях гепатита, индуцированного с помощью подкожного введения тетрациклина или тетрахлорида углерода [б]. Предполагается, что этот эф­фект, а также противовоспалительные, гастро- и ангиозащнтные свойства ДГК связаны с наличием у него антиоксидантных свойств.

Аккумуляция ДГК в ткани печени может повли­ять на ее ХЛ, инициированную ионами Fе2+. При добавлении сульфата железа к гомогенату печени развивалось свечение, интенсивность которого достигала максимальных значений через 15 мин после введения инициатора (рис. 2, а). С увеличе­нием количества гомогената печени, вносимого в реакционную среду, интенсивность ХЛ увеличива­лась практически прямо пропорционально (рис. 2, б). Поскольку накопление ТБК-РП липидной пе­роксидации в реакционной среде за время, равное 15 мин, от количества добавленного гомогената ме­нялось аналогичным образом (рис. 2, б), то право­мерно с помощью регистрации ХЛ оценивать спо­собность липидов печени подвергаться Fе2-инду-цированному СРО. Эта способность зависит от соотношения в исследуемом объекте количества субстрата окисления, гидропероксидов и антиок­сидантов [1]. В связи с тем что количество субстра­та окисления в гомогенатах печени разных живот­ных неодинаково, в настоящей работе интенсив­ность ХЛ гомогената нормировали на содержание липидов в образце. Обнаружено (рис. 3), что ин­тенсивность нормированной ХЛ гомогенатов пече­ни животных 2-й группы на 40-е и 70-е сутки на­блюдения достоверно превышала значения этого показателя у животных 1-й и 3-й групп (р < 0,05), что может быть связано, в частности, с высоким уровнем липидных гидропероксидов в печени об­лученных мышей (см. рис. 1, б). В свою очередь ин­тенсивность нормированной ХЛ гомогенатов пече­ни животных 3-й группы к концу эксперимента (155 сут) была соответственно в 1,3 и 1,5 раза ниже по сравнению с таковой у животных 1-й и 2-й групп (р< 0,001). Не исключено, что меньшая окисляемость ткани печени животных 3-й группы


Рис. 3. Интенсивность ХЛ гомогенатов печени мышей: свет­лые кружки — интактных, темные — облученных, треугольни­ки — облученных, получавших ДГК.

По оси абсцисс — срок наблюдении, сут; по оси ординат — интенсивность ХЛ, отн. ед. на 1 мг липидов.


в присутствии ионов Fe2+ обусловлена накоплени­ем в ней ДГК и продуктов его метаболизма, замед­ляющих процесс окисления.

Выводы

1. Показано, что ДГК тормозит развитие СРО липидов в плазме крови и печени мышей, подверг­нутых общему  - облучению.

2. Полученные результаты открывают перспек­тивы использования ДГК не только в качестве пи­щевой добавки, но и как лекарственного средства для защиты организма человека от реакций СРО, которые активируются при различных патологиче­ских состояниях и неблагоприятных воздействиях факторов внешней среды.

ЛИТЕРАТУРА

1. Владимиров Ю. А., Арчаков А. И. Перекисное окисление ли­пидов в биологических мембранах. — М.. 1972.

2. Гаврилов В. Б., Гаврилова А. Р., Мпжуль Д.М. Анализ мето­дов определения продуктов перекисного окисления липи­дов в сыворотке крови по тесту с тиобарбитуровой кисло­той // Вопр. мед. химии. — 1987. — № ;. — С. 118—122.

3. Дементьева Г. С., Фарбер Н. А., Брагинский Д. М. и др. Кверцетин в терапии вирусного гепатит В; // Сов. мед. — 1990. - № 3. - С. 102-104.

4. Захарова Н. А., Богданов Г. Н., Запрометов М. Н. и др. Ан­тирадикальная эффективность некоторых природных фе­нольных соединений //Журн. общ. химии — 1970. — Т. 42, № 6. - С. 1414-1420.

5. Клебанов Г. И., Теселкин Ю. О., Бабенков И. В. и др. Ин-гибирование дигидрокверцетином свободнорадикального окисления липидов сухого молока // Биотехнол. и управ­ление, - 1995. — № 1. - С. 36—39.

6. Колхир В. К., Тюкавкина Н. А., Быков В. А. и др. Диквертин

— новое антиоксидантное и капилляропротекторное сред­ство // Хим.-фарм. журн. — 1995. — № 9. — С. 61—64.

7. Палагина М. В., Хасина М. А., Гельцер Б. И., Девятое А. П. Антиокислительное действие препарата солодки уральской при остром поражении сурфактанта легких тотальным у-облучением // Вопр. мед. химии. — 1995. — № 1. — С. 32— 34.

8. Руленко И. А., Колесник Ю. А., Тюкавкина Н. А. и др. Кон­дитерские изделия с добавками биологически активных ве­ществ. 2. Антиоксидантное действие дигидрокверцетина в составе сахаристых кондитерских изделий на жировой ос­нове // Биотехнол. и управление. — 1993. — № 3—4. — С. 27-30.

9. Теселкин Ю. О., Бабенкова И. В., Жамбалова Б. А. и др. Ис­следование механизма антиоксидантного действия дигид­рокверцетина // Международный симпозиум "Экология человека: проблемы и состояние лечебно-профилактиче­ского питания", 3-й: Тезисы докладов. — 1994. — Ч. 2. — С. 305-306.

10. Теселкин Ю. О., Жамбалова Б. А., Бабенкова И. В. и др. Ан-тиоксидантные свойства дигидрокверцетина // Биофизика.

- 1996. - Т. 41, № 3. - С. 620-623.

11. Тюкавкина Н. А., Руленко И. А., Колесник Ю. А. Природные флавоноиды как пищевые антиоксиданты и биологически активные добавки // Вопр. питания. — 1996. — № 2. — С. 33-38.

12. Фролов В. М., Германов В. Т.. Пересадин Н. А. Эффектив­ность применения иммунокорректоров и антиоксидантов у беременных с хронической патологией гепатобилиарной системы // Акуш. и гин. — 1993. — № 3. -- С. 51—53.

13. Klebanov С. /., Tese/kin Yu. О., Babenkova I. V. et al. Effect of lipophilic antioxidants on peroxidation of liposome membranes photosensitized by hematoporphyrin derivatives upon Hc-Ne la­ser irradiation// Membr. Cell Biol. - 1996. - Vol. 10, N 2. — P. 139-143.

14. Rice-Evans C. A., Miller N. J., Puganga G. Structure-antioxidant activity relationships of flavonoids and phenolic acids // Free Radic. Biol. Med. - 1996. - Vol. 20, N 7. - P. 933-956.



1Данная работа поддержана грантом РФФИ № 98-04-48657 (А. В. Асейчев, РГМУ).

Добавить документ в свой блог или на сайт

Похожие:

Ю. О. Теселкин, И. В. Бабенкова, Г. И. Клебанов, А. В. Асейчев, Н. А. Тюкавкина, Ю. А. Колесник, И. А. Руленко, В. К. Колхир антиоксидантное действие дигидрокверцетина при общем  облучении1 iconОт «Ж» 2013г
Положение о выдаче выпускникам документов государственного образца об основном общем и среднем (полном) общем образовании

Ю. О. Теселкин, И. В. Бабенкова, Г. И. Клебанов, А. В. Асейчев, Н. А. Тюкавкина, Ю. А. Колесник, И. А. Руленко, В. К. Колхир антиоксидантное действие дигидрокверцетина при общем  облучении1 iconПриказ Министерства образования и науки Российской Федерации (Минобрнауки...
Утвержден порядок заполнения, учета и выдачи аттестатов об основном общем и среднем общем образовании и их дубликатов

Ю. О. Теселкин, И. В. Бабенкова, Г. И. Клебанов, А. В. Асейчев, Н. А. Тюкавкина, Ю. А. Колесник, И. А. Руленко, В. К. Колхир антиоксидантное действие дигидрокверцетина при общем  облучении1 iconПриказ Минобрнауки России от 14. 02. 2014 n 115 "Об утверждении Порядка...
Об утверждении Порядка заполнения, учета и выдачи аттестатов об основном общем и среднем общем образовании и их дубликатов

Ю. О. Теселкин, И. В. Бабенкова, Г. И. Клебанов, А. В. Асейчев, Н. А. Тюкавкина, Ю. А. Колесник, И. А. Руленко, В. К. Колхир антиоксидантное действие дигидрокверцетина при общем  облучении1 iconВозможность использования диквертина (дигидрокверцетина) для лечения...
Увеличение числа пожилых и старых людей в структуре населения является одним из важных демографических факторов нашей эпохи, их число,...

Ю. О. Теселкин, И. В. Бабенкова, Г. И. Клебанов, А. В. Асейчев, Н. А. Тюкавкина, Ю. А. Колесник, И. А. Руленко, В. К. Колхир антиоксидантное действие дигидрокверцетина при общем  облучении1 iconСвязывание свободных радикалов и предохранение от перикисного окисления
Диквертин (дигидрокверцетин) новое антиоксидантное и капилляропротекторное средство

Ю. О. Теселкин, И. В. Бабенкова, Г. И. Клебанов, А. В. Асейчев, Н. А. Тюкавкина, Ю. А. Колесник, И. А. Руленко, В. К. Колхир антиоксидантное действие дигидрокверцетина при общем  облучении1 iconКолесник В. Д., Полтырев Г. Ш. Курс теории информации
Сети ЭВМ и телекоммуникации, сетевые технологии, распределенные автоматизированные системы обработки информации и управления

Ю. О. Теселкин, И. В. Бабенкова, Г. И. Клебанов, А. В. Асейчев, Н. А. Тюкавкина, Ю. А. Колесник, И. А. Руленко, В. К. Колхир антиоксидантное действие дигидрокверцетина при общем  облучении1 iconПриказ от 14 декабря 2010 г. N 1763 об утверждении и введении в действие...
Об утверждении и введении в действие федерального государственного образовательного стандарта высшего профессионального образования...

Ю. О. Теселкин, И. В. Бабенкова, Г. И. Клебанов, А. В. Асейчев, Н. А. Тюкавкина, Ю. А. Колесник, И. А. Руленко, В. К. Колхир антиоксидантное действие дигидрокверцетина при общем  облучении1 iconПриказ от 4 мая 2010 г. N 464 об утверждении и введении в действие...
Об утверждении и введении в действие федерального государственного образовательного стандарта высшего профессионального образования...

Ю. О. Теселкин, И. В. Бабенкова, Г. И. Клебанов, А. В. Асейчев, Н. А. Тюкавкина, Ю. А. Колесник, И. А. Руленко, В. К. Колхир антиоксидантное действие дигидрокверцетина при общем  облучении1 iconПриказ от 13 января 2010 г. N 18 об утверждении и введении в действие...
Об утверждении и введении в действие федерального государственного образовательного стандарта высшего профессионального образования...

Ю. О. Теселкин, И. В. Бабенкова, Г. И. Клебанов, А. В. Асейчев, Н. А. Тюкавкина, Ю. А. Колесник, И. А. Руленко, В. К. Колхир антиоксидантное действие дигидрокверцетина при общем  облучении1 iconПриказ от 14 сентября 2010 г. N 924 об утверждении и введении в действие...
Приказ Минобрнауки РФ от 14. 09. 2010 n 924"Об утверждении и введении в действие федерального государственного образовательного стандарта...

Литература


При копировании материала укажите ссылку © 2015
контакты
literature-edu.ru
Поиск на сайте

Главная страница  Литература  Доклады  Рефераты  Курсовая работа  Лекции